Ćwiczenie 4.pdf

(10581 KB) Pobierz
22.04.2022
Materiały do ćwiczeń z przedmiotu
Immunologia Weterynaryjna dla
Wydziału Medycyny Weterynaryjnej
UPWr
Niniejsze opracowanie zostało stworzone przez pracowników Uniwersytetu Przyrodniczego we Wrocławiu w ramach
wykonywania obowiązków związanych z kształceniem studentów i jest przeznaczone dla studentów II roku Wydziału
Medycyny Weterynaryjnej na potrzeby dydaktyczne bez prawa do dalszego rozpowszechniania
Ćwiczenie 4 - Mechanizmy odporności nieswoistej
Izolacja granulocytów
Funkcje granulocytów
Zakład Immunologii i Prewencji Weterynaryjnej
Uniwersytet Przyrodniczy we Wrocławiu
Odporność wrodzona (nieswoista)
Cechy charakterystyczne
Jakie są jej składowe?
Składowe odporności wrodzonej:
bariery anatomiczne
bariery fizjologiczne
składniki komórkowe
składniki humoralne
Jakie komórki stanowią główne ogniwo łączące elementy odporności wrodzonej z
elementami odporności nabytej?
(komórki dendrytyczne
)
1
22.04.2022
Odporność wrodzona (nieswoista)
Cechy elementów komórkowych
Które z komórek układu immunologicznego są komórkami zdolnymi
do intensywnej fagocytozy?
Komórki fagocytujące
monocyty
neutrofile
makrofagi
eozynofile
Odporność wrodzona (nieswoista)
Cechy charakterystyczne
Zastanówmy się jakie posiada cechy?
Cechy odporności wrodzonej:
niezmienność w rozpoznawaniu Ag
brak pamięci o Ag
szybkość odpowiedzi
zdolność komórek do spontanicznej fagocytozy (np. węgiel, karbonylek)
zdolność komórek do immunofagocytozy (z udziałem opsonin)
wybiórcza aktywacja komórek poprzez interakcję PRR - PAMP
2
22.04.2022
Cechy granulocytów:
zdolność ruchu
zdolność adherencji:
a)
in vivo
– do powierzchni śródbłonka naczyń włosowatych i do migracji przez ścianę naczyń do tkanek
(czynniki chemotaktyczne)
b)
in vitro
– do powierzchni szkła i plastiku
zdolność rozpoznawania (PRR – PAMP/ cząsteczki zopsonizowane) i fagocytowania
zdolność zabijania (destrukcji) na drodze mechanizmów zależnych
i niezależnych od tlenu:
a) wewnątrzkomórkowo
b) zewnątrzkomórkowo (ADCC)
Pobranie krwi
(morfologia)
(biochemia)
3
22.04.2022
Izolacja granulocytów
2000 obr/min 7min
(850 x g)
45 sek
1500 obr/min 10min
(500 x g)
PBS
10 x stęż.
płyn
woda
erytrocyty i leukocyty
komórki
Jakie testy możemy przeprowadzić na wyizolowanych komórkach?
Chemotaksja
• Test pod agarem
• Test w komorze
Boydena
• Migratest
Fagocytoza
• Metoda szkiełkowa
• Metoda probówka
• Phagotest
Zabijanie
wewnątrzkomórkowe
• Test zabijania
wewnątrzkomórkowego
• Test NBT
• Phagoburst
4
22.04.2022
Chemotaksja
Badanie zdolności do ruchu granulocytów
1. Chemotaksja:
def. ukierunkowany ruch komórek indukowany gradientem substancji chemicznej określanej jako
czynnik chemotaktyczny (chemoatraktant, chemotaksyna)
zdolnością do chemotaksji obdarzone są granulocyty, makrofagi, monocyty, limfocyty, fibroblasty,
bakterie, pierwotniaki
czynniki chemotaktyczne dzielimy na egzo- (N-formylowane peptydy, kazeina, zymosan, inulina) i
endo-genne (C3a, C5a; IL-8; pochodne kwasu arachidonowego; leukotrieny B4; fibrynogen,
płytkowy czynnik IV, czynnik aktywujący płytki PAF)
2. Chemokineza
def. wzmożona aktywność ruchowa komórki w przypadkowym kierunku wywołana czynnikiem
chemotaktycznym
5

Plik z chomika:

Inne pliki z tego folderu:

Inne foldery tego chomika:

Zgłoś jeśli naruszono regulamin